如何使用细胞分离液

发布日期:2023-12-08 17:12:13   浏览量 :129
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细胞分离液的配置与使用:
1、不同浓度分离液的制备: 先用9份分离液与1份8.5% NaCl或1.5MPBS混合达到生理性渗透压,然后用生理溶液稀释到所需浓度。
2、不连续密度梯度层的制备: 先将试管壁用牛血清湿润,除去多余血清,这种预处理可使逐层叠加的液平稳沿管壁流下,使形成满意的界面。
在制备过程中一般用长针头注射器从高密度向低密度逐层放置,有时相邻两层比重相差不大时,可将液放入注射器中,小针头斜面紧贴管壁,任其自然慢慢流下。
3、装样:样品体积和细胞浓度根据不同细胞而异,一般加样体积不宜过大,细胞浓度也不可过高,否则会影响细胞的分离和回收。
4、离心:一般采用离心力为400g,时间20~25min。
由于多层之间密度差别不大,因此离心机加速、降速时要慢,要平稳。
5、取样:当所要分离的细胞绝大部分在两层的界面时,可逐层去除液后收集界面部位的细胞;有时大部分细胞位于层中,则需要逐层收集。收获含有液的细胞经2次洗涤后可供培养或检测用。

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