夹心 ELISA 是一种常用于检测和定量免疫测定中抗原的 ELISA。它是一种酶联免疫吸附测定,使用两种抗体:捕获抗体和检测抗体。在这种技术中,样品中的抗原在抗体之间结合。ELISA的目的是检测样品中靶抗原的存在。因此,在夹心ELISA的情况下,靶抗原在捕获抗体和检测抗体之间结合。在程序开始时,捕获抗体已经固定在表面上。然而,检测抗体是定量前的最后一步。夹心ELISA中的两种抗体结合到靶抗原上的不同位置。此外,捕获抗体和靶标抗体不干扰彼此的结合能力非常重要。
夹心ELISA中的步骤包括用捕获抗体涂覆表面,阻断表面上未结合的蛋白质结合侧,添加含有靶抗原的样品,添加检测抗体标记的偶联物和检测。该技术的优点是其高特异性和高灵敏度。然而,其主要缺点是捕获和检测抗体之间的相互作用。
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