CCK-8细胞增殖实验介绍

发布日期:2024-07-09 17:06:08   浏览量 :35
发布日期:2024-07-09 17:06:08  
35

1)制备细胞悬液,计数。
2)在96孔板中接种细胞悬液,每孔约100μl,同样的样本可做3个重复。
3)将培养板放入培养箱中预培养一段时间(37℃, 5%CO2),细胞贴壁需要大约2-4h,如果是悬浮细胞,该步骤可以省去。
4)每孔各加入10μl CCK-8溶液,由于加入的CCK-8量比较少,可能会因试剂沾在孔壁上而带来误差,建议在加完试剂后轻轻晃动培养板以帮助混匀,或者直接配置含10%CCK-8的培养基,以换液的形式加入。另外注意,加样的过程中尽量不要产生气泡。
5)将培养板放入培养箱中孵育1-4h。因为细胞种类不同,形成的formazan的量也不一样,所以如果显色不够的话,可以延长培养时间,特别是血液细胞形成的formazan很少,需要较长的显色时间(5-6h)。
6)酶标仪测定450nm处的吸光值(OD)。
7)若暂时不测定OD值,可以在各孔中加入10μl 0.1 M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液,室温下避光保存,这样可以保证OD值在24h内不发生变化。

*以上内容来自网络

公司 浙江联硕生物科技有限公司
关注公众号
客服小徐
免责声明:本站部分资讯、图片来源于网络及网友投稿,如有侵权请及时联系客服,我们将尽快处理。
版权所有:浙江联硕生物科技有限公司
云计算支持 反馈 枢纽云管理