ELISA的原理和常见类型

原理

Elisa本质上是利用了抗原和抗体的特异性结合反应将待测物和酶连接，通过酶与底物产生颜色反应来定量检测样品中目的蛋白浓度。

常见类型

直接法：将抗原固定在板上，用酶标抗体直接检测抗原。

间接法：将抗原固定在板上，先加入检测抗体和抗原特异性结合，然后加入酶标二抗和底物显色。

夹心法：将捕获抗体固定在板上，与抗原结合后加入捕获抗体，之后和直接法或间接法类似，区别在于捕获抗体是否酶标记。

竞争法：将抗体固定在板上，一组加入样品和酶标抗原混合液，另一组加入酶标抗原，样品中的待测抗原越多，能竞争掉越多的酶标抗原，输出信号越弱。故输出信号和样品中待测抗原浓度成反比。

优缺点

直接法：

操作简单，不使用二抗避免交叉反应

标记一抗成本高，不使用二抗无信号放大

间接法：

成本低，二抗放大信号

使用二抗，交叉反应几率增加

夹心法： 

特异性强，灵敏度高

抗原必须有至少两个表位

竞争法：

可适用于低纯度样本

敏感度较差

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