ELISA的原理和常见类型

发布日期:2024-07-10 17:14:13   浏览量 :30
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原理

Elisa本质上是利用了抗原和抗体的特异性结合反应将待测物和酶连接,通过酶与底物产生颜色反应来定量检测样品中目的蛋白浓度。


常见类型

直接法:将抗原固定在板上,用酶标抗体直接检测抗原。

间接法:将抗原固定在板上,先加入检测抗体和抗原特异性结合,然后加入酶标二抗和底物显色。

夹心法:将捕获抗体固定在板上,与抗原结合后加入捕获抗体,之后和直接法或间接法类似,区别在于捕获抗体是否酶标记。

竞争法:将抗体固定在板上,一组加入样品和酶标抗原混合液,另一组加入酶标抗原,样品中的待测抗原越多,能竞争掉越多的酶标抗原,输出信号越弱。故输出信号和样品中待测抗原浓度成反比。


优缺点

直接法:

操作简单,不使用二抗避免交叉反应

标记一抗成本高,不使用二抗无信号放大


间接法:

成本低,二抗放大信号

使用二抗,交叉反应几率增加


夹心法: 

特异性强,灵敏度高

抗原必须有至少两个表位


竞争法:

可适用于低纯度样本

敏感度较差


*以上内容来自网络

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