组织冰冻切片包埋剂

使用前标本准备：

冰冻切片标本可采用 (1) 新鲜组织，特点是快速，但未用完的包埋组织块不能保存；(2) 使用经典方法10%甲醛或4%多聚甲醛室温2~10分钟固定过的组织，优点是既不影响后续步骤，包埋组织块又可长期冰冻保存，随时再用，缺点是步骤稍繁。(3) 培养细胞，800g离心10分钟收集培养细胞，用吸头或针头拨出细胞沉淀块，放入OCT包埋剂内。

应避免采用降低组织冰点的甲醇乙醇固定。本产品说明书不提供关于组织取材、渗透、固定、冰冻切片等技术信息。用户应阅读冰冻切片机操作手册，参考各种常规技术方法。

使用方法：

1. OCT包埋：用水或PBS冲洗固定的组织块，用吸水纸吸去液体。在盛标本的包埋模子内，挤出适量的包埋剂，放入组织和细胞沉淀块，加包埋剂完全埋没组织块。可用2层铝箔纸折叠成简易的模子。如有气泡可用针头或吸头吸出。

2. 冰冻：将盛有组织细胞和包埋剂的模子，正置于切片机冷室内冰冻10分钟。此时，包埋剂为乳白色固体。包埋剂和组织冷冻时体积略有膨胀，因此模子应正置，由底部向顶部进行冰冻。也可将OCT包埋的组织置于干冰或液氮，或放入－40~－70 ºC冰箱冰冻固化保存，用前取出置于切片机冷室内平衡温度(否则损坏刀)。

3．切片：可在切片机的组织卡盘(chuck)上加少许包埋剂并在其固化前嵌入组织块，然后再于组织周围加入少许包埋剂使其稳定。进行常规切片，厚度范围2~100 µm。

4. 收片后，用适量水或PBS冲洗切片3次，每次2−3分钟，洗除包埋剂。而后可进行常规组化染色、病理染色、原位杂交。未用完的组织块可冷冻储存。

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