透析袋的工作机制与使用前的预处理

发布日期:2025-04-02 17:20:20   浏览量 :19
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一、透析的原理

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状,将生物大分子样品溶液置入袋内,将此透析袋浸入水或缓冲液中,样品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋内,而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外,直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”,袋(膜)外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

透析的动力是扩散压,扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度,还正比于膜的面积和温度,通常是4℃透析,升高温度可加快透析速度。

二、透析袋使用前的处理

为防干裂,出厂前透析袋一般都经10%的甘油处理,透析袋中含有微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质,它们对蛋白质和其他生物活性物质有害,用前必须除去。新购进的普通型透析袋必须经过处理才能使用。处理方法如下。

1.把透析袋剪成适当长度(10-20cm)的小段。

2.在大体积(500ml)的2%(w/v)的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA2Na(pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。

3.用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4.放在500ml的1mmol/L EDTA2Na(pH=8.0)中将之煮沸10min。

5.冷却后,置于30%或者50%的酒精中,放于4℃冰箱,必须确保透析袋始终浸没在溶液内,从此时其取用透析袋必须戴手套。

6.在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。


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